CRISPR/Cas13a具有RNA引導的RNA切割能力，RNA引導反式核酸內切酶活性是高度特異的，高效切割ssRNA，每個激活Cas13a蛋白可以識別10⁴ 拷貝RNA。CRISPR/Cas13a強大信號放大能力使RNA檢測靈敏度能夠降低到飛摩爾（10^-15M）水平。

基于CRISPR/Cas13的信號放大能力，建立CRISPR/Cas signal amplification Linked ImmunoSorbent Assay，簡稱“CLISA”

1、CLISA檢測原理

CLISA是CRISPR-based單分子免疫診斷技術平臺，靈敏度達fM或fg/mL，精準分析多種疾病的超低濃度生物標志物。

結合傳統三明治結構免疫結合機制，用含有T7啟動子序列生物素化雙鏈DNA（dsDNA）取代酶放大體系。T7聚合酶識別啟動子序列進行轉錄，產生大量單鏈RNA分子拷貝。crRNA識別轉錄RNA分子導致CRISPR/Cas13反式切割活性激活。兩端熒光團和猝滅基團標記的短ssRNA報告探針通過反式切割活性被切割。

相較于傳統免疫檢測方法ELISA，CLISA靈敏度可提升1,000倍，檢測限達到fm/mL或fg/mL。

      2、主要試劑組分

3、試劑盒檢測性能

 反應時間：3小時  (免疫反應0.5小時，轉錄反應1小時，Cas熒光信號檢測0.5小時

 線性范圍：50fg/mL~5ng/mL

 最低檢測限：10fg/mL

4. 開發產品線

       CLISA主要用于fmol濃度的診斷標志物的臨床產品開發。